产品名称:小鼠乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA定量检测试剂盒
货号:BNEK-M-631379
96T/2200 | 48T/1800
产品规格
小鼠
0.15625-20ng/mL
经样本测试,本试剂盒的检测灵敏度为0.15625ng/mL。
2-8℃
乙酰胆碱酯酶,简称AChE,是生物神经传导中的一种关键性酶,在胆碱能突触间,该酶能降解乙酰胆碱,终止神经递质对突触后膜的兴奋作用,保证神经信号在生物体内的正常传递。 具有羧肽酶和氨肽酶的活性。它活性高,选择性水解Ach的必需酶。胆碱酯酶中的I型(即true choli-neesterase)底物特异性高,因为只分解以乙酰胆碱为中心的狭窄范围的底物,故特此这样称呼。乙酰胆碱酯酶参与细胞的发育和成熟,能促进神经元发育和神经再生。
本试剂盒采用双抗体夹心法ELISA技术:将捕获抗体包被于酶标板上,捕获样品及标准品中的待测物AChE,清洗后,再加入生物素标记的检测抗体进行孵育后清洗,形成“捕获抗体-抗原-检测抗体”免疫复合物,随后加入链霉亲和素偶联的辣根过氧化物酶进行孵育,待孵育结束后清洗,接着加入TMB显色后,若样本中有待测物则显蓝色,加入终止液停止反应。检测过程中游离的成分均被洗去,用酶标仪在450 nm处测OD值,颜色的深浅和样品中的待测物的含量呈正比,通过绘制标准曲线计算出样本中AChE的浓度。
所有标准品、样品建议复孔检测 1.酶标板准备:确定试验所需要的孔数,取下未使用的酶标条放回装有干燥剂的铝箔袋。 2.样本孵育:每孔分别加入100μL不同浓度的标准品以及预处理过的待测样品(建议样本用通用稀释液最少稀释1倍上样,目的是减少基质效应),盖上封板胶纸,37℃避光反应1 h。孵育结束后,每孔加入300μL 1×洗涤缓冲液,轻轻晃动30秒,甩干并在纸上拍干,以这种方式清洗3次。 3.抗体孵育:每孔加入100μL生物素化抗体工作液,轻轻混匀,盖上封板胶纸,37℃避光反应1h。孵育结束后,重复步骤2中的
计算标准品和样本复孔的平均OD值并减去空白孔的OD值作为校正值。以浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出四参数逻辑函数的标准曲线(作图时去掉空白组的值)。或者使用能够生成四参数逻辑(4-P)曲线拟合的计算机软件来创建标准曲线。 若样品OD值高于标准曲线上限,应适当稀释后重测并在计算样本浓度时乘以相应的稀释倍数。
板内变异系数小于10%,板间变异系数小于10%
见说明书
见说明书
该试剂盒测定可识别重组小鼠AChE。 其他相关蛋白在稀释缓冲液中制备为50ng/mL,并测定交叉反应性。没有观察到明显的交叉反应。
引用文献
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