产品名称:小鼠钠/钾离子转运ATP酶α1肽 (ATP1a1) ELISA定量检测试剂盒
货号:BNEK-M-632824
96T/2200 | 48T/1800
产品规格
小鼠
62.5~4000pg/mL
经样本测试,本试剂盒的检测灵敏度为31.25pg/mL。
2-8℃
钠/钾离子转运ATP酶α1肽,也被称为ATP1a1,是由ATP1a1基因编码的酶,该基因编码的蛋白质属于P型阳离子转运ATP酶家族和Na⁺/K⁺ATP酶亚家族,Na⁺/K⁺ATP酶是一种完整的膜蛋白,负责建立和维持Na和K离子穿过质膜的电化学梯度,这些梯度对于渗透调节,各种有机和无机分子的钠偶联运输以及神经和肌肉的电兴奋性至关重要,该酶由两个亚基组成,一个大的催化亚基(α)和一个较小的糖蛋白亚基(β),Na + /K+-ATP酶的催化亚基由多个基因编码,该基因编码α1亚基,已经鉴定出编码不同亚型的交替剪接
本试剂盒采用双抗体夹心法ELISA技术:将捕获抗体包被于酶标板上,捕获样品及标准品中的待测物ATP1a1,清洗后,再加入生物素标记的检测抗体进行孵育后清洗,形成“捕获抗体-抗原-检测抗体”免疫复合物,随后加入链霉亲和素偶联的辣根过氧化物酶进行孵育,待孵育结束后清洗,接着加入TMB显色后,若样本中有待测物则显蓝色,加入终止液停止反应。检测过程中游离的成分均被洗去,用酶标仪在450 nm处测OD值,颜色的深浅和样品中的待测物的含量呈正比,通过绘制标准曲线计算出样本中ATP1a1的浓度。
所有标准品、样品建议复孔检测 1.酶标板准备:确定试验所需要的孔数,取下未使用的酶标条放回装有干燥剂的铝箔袋。 2.样本孵育:每孔分别加入100μL不同浓度的标准品以及预处理过的待测样品(建议样本用通用稀释液最少稀释1倍上样,目的是减少基质效应),盖上封板胶纸,37℃避光反应1 h。孵育结束后,每孔加入300μL 1×洗涤缓冲液,轻轻晃动30秒,甩干并在纸上拍干,以这种方式清洗3次。 3.抗体孵育:每孔加入100μL生物素化抗体工作液,轻轻混匀,盖上封板胶纸,37℃避光反应1h。孵育结束后,重复步骤2中的
计算标准品和样本复孔的平均OD值并减去空白孔的OD值作为校正值。以浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出四参数逻辑函数的标准曲线(作图时去掉空白组的值)。或者使用能够生成四参数逻辑(4-P)曲线拟合的计算机软件来创建标准曲线。 若样品OD值高于标准曲线上限,应适当稀释后重测并在计算样本浓度时乘以相应的稀释倍数。
板内变异系数小于10%,板间变异系数小于10%
见说明书
见说明书
该试剂盒测定可识别重组小鼠ATP1a1。 其他相关蛋白在稀释缓冲液中制备为50ng/mL,并测定交叉反应性。没有观察到明显的交叉反应。
引用文献
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