产品名称:小鼠CD34分子 (CD34) ELISA定量检测试剂盒
货号:BNEK-M-631689
96T/2200 | 48T/1800
产品规格
小鼠
0.157~10ng/mL
经样本测试,本试剂盒的检测灵敏度为0.08ng/mL。
2-8℃
CD34分子(CD34)是由CD34基因编码的一种跨膜磷脂蛋白,CD34的名字来自于识别细胞表面抗原的分化簇协议,它最早由Civin等人和Tindle等人在造血干细胞上独立描述,是一种细胞表面糖蛋白,并作为一种细胞-细胞粘附因子发挥作用,它也可能介导造血干细胞附着在骨髓细胞外基质上或直接附着在基质细胞上,在临床上,它与骨髓移植的造血干细胞的选择和富集有关,由于这些历史和临床联系,CD34的表达几乎无处不在地与造血细胞有关;然而,它实际上也存在于许多其他类型的细胞上。
本试剂盒采用双抗体夹心法ELISA技术:将捕获抗体包被于酶标板上,捕获样品及标准品中的待测物CD34,清洗后,再加入生物素标记的检测抗体进行孵育后清洗,形成“捕获抗体-抗原-检测抗体”免疫复合物,随后加入链霉亲和素偶联的辣根过氧化物酶进行孵育,待孵育结束后清洗,接着加入TMB显色后,若样本中有待测物则显蓝色,加入终止液停止反应。检测过程中游离的成分均被洗去,用酶标仪在450 nm处测OD值,颜色的深浅和样品中的待测物的含量呈正比,通过绘制标准曲线计算出样本中CD34的浓度。
所有标准品、样品建议复孔检测 1.酶标板准备:确定试验所需要的孔数,取下未使用的酶标条放回装有干燥剂的铝箔袋。 2.样本孵育:每孔分别加入100μL不同浓度的标准品以及预处理过的待测样品(建议样本用通用稀释液最少稀释1倍上样,目的是减少基质效应),盖上封板胶纸,37℃避光反应1 h。孵育结束后,每孔加入300μL 1×洗涤缓冲液,轻轻晃动30秒,甩干并在纸上拍干,以这种方式清洗3次。 3.抗体孵育:每孔加入100μL生物素化抗体工作液,轻轻混匀,盖上封板胶纸,37℃避光反应1h。孵育结束后,重复步骤2中的
计算标准品和样本复孔的平均OD值并减去空白孔的OD值作为校正值。以浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出四参数逻辑函数的标准曲线(作图时去掉空白组的值)。或者使用能够生成四参数逻辑(4-P)曲线拟合的计算机软件来创建标准曲线。 若样品OD值高于标准曲线上限,应适当稀释后重测并在计算样本浓度时乘以相应的稀释倍数。
板内变异系数小于10%,板间变异系数小于10%
该试剂盒测定可识别重组小鼠CD34。 其他相关蛋白在稀释缓冲液中制备为50ng/mL,并测定交叉反应性。没有观察到明显的交叉反应。
引用文献
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